Microscopia en campo oscuro

Qué podemos observar con este tipo de microscopios

• Diminutos organismos acuáticos vivos, diatomeas, pequeños insectos, huesos, fibras, cabellos, bacterias teñidas, levaduras, células sanguíneas y protozoos.
• Entre las muestras no biológicas se incluyen: los minerales y cristales químicos, coloides, las muestras de polvo y las secciones delgadas de polímeros y materiales cerámicos que contienen pequeñas inclusiones o diferencias de porosidad.

Qué podemos observar con este tipo de microscopios

• Las células sanguíneas habituales (eritrocitos, leucocitos y trombocitos) en estado saludable o patológico.
• Residuos metabólicos (ácido úrico, colesterol, placas tóxicas digestivas, placas tóxicas ácidas, simplastos, etc.)
• Agregaciones plaquetarias.
• Partículas dispersas en un medio homogéneo.
• La observación del movimiento Browniano de las partículas.
• Microorganismos con diámetros superior a 0.2 um.
• Fibrina
• Parásitos simbiontes en fases primitivas, parásitos simbiontes en fases bacterianas patógenas.
• Bacterias.
• Hongos.
• Evolución de las células sanguíneas con el paso del tiempo.
• Se puede utilizar para la observación de preparaciones vivas, sin colorear.
• Visualiza los bordes destacados de las muestras.
• Espirochetas (Lyme)

Su aplicación al campo de la biología, la medicina y la educación para la salud

or supuesto esta técnica se utiliza en diferentes campos científicos. Sin embargo, fue el Profesor Dr, Günther Enderlein, quien con su investigación sobre las células y el plasma sanguíneo le ha dado popularidad en el campo de la medicina biológica sobre todo en Europa y más específicamente en Alemania.
Es en este pais, donde se han publicado los principales libros que nos hablan de esta técnica, enfatizando o encaminadas a las directrices que dejó enderlein y el Pleomorfismo.
Algunos de estos son: “Ciclogenia de las bacterias” (Bacteria Cyclogeny) de Günther Enderlein.
De sus más fervientes defensoras tenemos a María M. Bleker que ha publicado: “Examen de sangre en campo oscuro” (Blutuntersuchung im Dunkelfeld) y el más reciente publicado en 2004 “El amigo anónimo o ¿el enemigo desconocido?” (Der verkannte Freund oder der unbekannte Feind).
Otro libro es “Introducción a los Diagnósticos en Campo Oscuro” (Einführung in die Dunkelfelddiagnostik) de, Cornelia Schwerdtle y Franz Arnoul..
Todo esto ha sido el resultado de la lucha por defender posiciones irreconciliables entre si como ha sido el Monomorfismo y el Polimorfismo.
De modo que desde el principio del siglo pasado hasta ahora se ha utilizado para estudiar las células sanguíneas así como el plasma en vivo y sin tinciones.
Se extrae una gota de sangre de un dedo y se coloca sobre un cubreobjetos. Después se extiende sobre el portaobjetos. Se coloca aceite de inmersión sobre el condensador del microscopio de campo oscuro y después la muestra sobre la platina del microscopio. A continuación se sube el condensador hasta que haga contacto con el porta y se disperse el aceite sobre la muestra por debajo del cristal. Después se empieza a enfocar con el objetivo de menor aumento y ahí está la sangre en campo oscuro. Hasta unos 400 aumentos podemos verlo sin utilizar más aceite. Sin embargo, para poder observar toda la información que la sangre nos pueda dar hay que utilizar el objetivo de 100X. Para ello, se vuelve a echar una gota de aceite de inmersión encima del cubreobjetos y se coloca el objetivo de 100X sobre la muestra hasta que haga el contacto justo para poder ver las células y coloides sanguíneos en todo su esplendor.
Las dos fases de contacto con la muestra y el ajuste del condensador cardiode con sus tornillos es lo más delicado para tener una excelente visión. Pablo Lastras Saludbio

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